色譜圖(chromatogram):樣品流經色譜柱和檢測器,所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elution profile)。色譜圖是用來觀察色譜行為和研究色譜理論的重要標尺;可以根據保留時間對未知化合物進行定性,根據色譜圖上測得的峰高或峰面積進行定量,根據各峰不同位置及峰寬變化狀態,可以對色譜柱的分離效率進行評價,并根據色譜圖的狀態來判斷操作條件的優劣。
色譜峰(peak):色譜柱流出組分通過檢測器系統時所產生的響應信號的微分曲線。
峰高(peak height,h):從峰的zui大值到峰底的距離。
峰寬(peak width,W):在峰兩側拐點處所作切線與峰底相交兩點之間的距離。
半峰寬(peak width at half-height,Wh/2):通過峰高的中點作平行于峰底的直線,此直線與峰兩側相交兩點之間的距離。
峰面積(peak area,A):峰與峰底所包圍的面積。
脫尾峰(tailing peak):后沿較前沿平緩的不對稱峰。
前伸峰(leading peak):前沿較后沿平緩的不對稱峰。
鬼峰(ghost peak):并非樣品所產生的峰。
畸峰(distorted peak):形狀不對稱的峰,如脫尾峰,前伸峰等。
基線(base line):在正常操作條件下,僅有流動相通過檢測器時所產生的響應信號曲線。
基線漂移(drift):基線隨時間定向的緩慢的變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩定所引起,柱內的污染物或固定相被洗脫下來也會產生漂移。
基線噪音(noise):基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。
譜帶擴展(Band Broadening):由于縱向擴散,傳質阻力等因素的影響,使組分在色譜柱內移動過程中譜帶寬度增加的現象。
拖尾因子(tailing factor,T):用以衡量色譜峰的對稱性。《中國藥典》規定T應為0.95~1.05。T<0.95為前延峰,T>1.05為拖尾峰。
死時間(dead time,t0):不保留組分的保留時間。即流動相(溶劑)通過色譜柱的時間。在反相HPLC中可用苯磺酸鈉來測定死時間。
死體積(dead volume,V0):由進樣器進樣口到檢測器流動池未被固定相所占據的空間。它包括4部分:進樣器至色譜柱管路體積、柱內固定相顆粒間隙、柱出口管路體積、檢測器流動池體積。
保留時間(retention time,tR):從進樣開始到某個組分在柱后出現濃度極大值的時間。
保留體積(retention volume,VR):從進樣開始到某組分在柱后出現濃度極大值時流出溶劑的體積。又稱洗脫體積。VR=F×tR
調整保留時間(adjusted retention time,t'):扣除死時間后的保留時間。t'R=tR-t0
調整保留體積(adjusted retention volume,V'R):扣除死體積后的保留體積。
理論塔板數(theoretical plate number,N):用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。N取決于固定相的種類、性質(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長、流動相的種類和流速及測定柱效所用物質的性質。在一張多組分色譜圖上,如果各組分含量相當,則后洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬,峰高則逐漸降低。用半峰寬計算理論塔數比用峰寬計算更為方便和常用,因為半峰寬更易準確測定,尤其是對稍有拖尾的峰。N與柱長成正比,柱越長,N越大。用N表示柱效時應注明柱長,如果未注明,則表示柱長為1米時的理論塔板數。
理論塔板高度(theoretical plate height,H):每單位柱長的方差。
分配系數(distribution coefficient,K):在一定溫度下,化合物在兩相間達到分配平衡時,在固定相與流動相中的濃度之比。
分離度(resolution,R):相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。表示相鄰兩峰的分離程度。